地区：上海市 宝山区
关键词：湖州市第一人民医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000001750
成果描述：
| 项目规定的主要内容：1.喉癌紫杉醇多药耐药细胞株Hep-2/Taxol的建立、生物特性及鉴定。2. Hep-2/Taxol细胞株中多药耐药相关miRNA的筛选。完成的技术指标：1.采用浓度递增法结合小剂量维持作用法，诱导获得喉癌紫杉醇多药耐药细胞株Hep-2/Taxol。2.分别采用光学显微镜观察Hep-2/Taxol细胞形态、细胞计数法绘制该细胞生长曲线及计算群体倍增时间、MTT法测定其对抗癌药物的耐受性、流式细胞术分析细胞周期及TUNEL染色检测细胞凋亡的变化，全面评价Hep-2/Taxol细胞的生物学特性。3.分别从mRNA及蛋白水平检测Hep-2/Taxol细胞中多药耐药基因MDR1及蛋白P-gp的表达水平。4.常规培养Hep-2细胞及Hep-2/Taxol细胞，抽提总RNA，提取低分子量(LMW) RNA，分别进行荧光标记。5. miRNA芯片杂交、清洗、扫描及数据分析，获得Hep-2及Hep-2/Taxol之间差异表达的miRNA。6.结合靶基因预测技术及荧光定量PCR技术从上述差异表达的miRNA中筛选出数个多药耐药相关的miRNA。完成的主要研究内容：1.建立喉癌紫杉醇多药耐药细胞株Hep-2/Taxol，多药耐药的生物特性及鉴定。2. Hep-2/Taxol细胞株中多药耐药相关miRNA的基因芯片的筛选。3. miRNA与靶基因的预测。相关研究已发表论文：人喉癌紫杉醇多药耐药细胞株中耐药相关miRNAs的表达差异的研究。 |
